Tests

EliSpot

EliSpot är en teknik som används för att bedöma T-cellers funktionella immunsvar mot olika antigener med hjälp av enzymbundna immunospotanalyser.

Eli Spot lyme coinfections plate washing

Diagnostiska möjligheter med EliSpot

Vårt laboratorium använder EliSpot som en av våra viktiga teknologier för att mäta cellulär immunitet och hjälpa till vid diagnos av olika infektioner som är svåra att upptäcka.

Ett brett spektrum av testbara sjukdomar:

EliSpot möjliggör testning av ett stort antal infektioner och patogener, inklusive kända patogener som Ehrlichia & Anaplasma, Bartonella, Babesia, samt virusinfektioner orsakade av Epstein-Barr-virus (EBV), herpes simplex-virus, cytomegalovirus och andra.

En djupdykning i immunförsvaret:

Genom att mäta det cellulära immunsvaret ger EliSpot inte bara möjlighet att övervaka effekten av behandlingar, utan också insikter i det T-cellsmedierade immunsvaret vid en mängd olika infektioner. Dess höga känslighet och specificitet gör den till ett värdefullt verktyg för diagnos och övervakning av infektionssjukdomar.

EliSpot: Ett mångsidigt verktyg för infektionsdiagnostik:

Vårt laboratorium använder EliSpot-tekniken för att diagnostisera och övervaka ett stort antal infektioner. Tack vare dess breda tillämpbarhet och dess förmåga att exakt detektera det cellulära immunsvaret, bidrar EliSpot avsevärt till den exakta diagnosen och behandlingen av infektionssjukdomar.

Vad kan man testa med EliSpot?

Lyme Borrelios
Ehrlichia- och Anaplasma-infektioner
Bartonella-infektion
Babesia-infektion
Chlamydia pneumoniae-infektion
Chlamydia trachomatis Infektion
Mykoplasma-infektion
Yersinia-infektion
Rickettsia-infektion
EBV-infektion (Epstein-Barr-Virus)
HSV-infektion (Herpes simplex Virus)
CMV-infektion
VZV-infektion (Varicella zoster virus))
HHV6-Virus infektion
HHV7-Virus infektion
Candida albicans-infektion
Aspergillus-infektion

Borrelia

Infektioner med Borrelia burgdorferi ger inte bara upphov till ett humoralt immunsvar i form av produktion av Borrelia-specifika antikroppar, utan aktiverar samtidigt det cellulära immunsvaret i form av specifika T-lymfocyter (EliSpot-test). Så snart borreliabakterierna inte längre är aktiva i kroppen bör det T-cellulära immunsvaret försvinna omedelbart och EliSpot-testet bör därför vara negativt.

I princip är det inte möjligt att med hjälp av borreliaantikroppar kontrollera om en effektiv borreliabehandling har lyckats, eftersom antikroppstitern i blodet kan kvarstå i flera år. Nya infektioner med Borrelia burgdorferi (t.ex. symtom på ringformad rodnad eller sommarinfluensa efter ett fästingbett) visar sig ofta först veckor senare i form av antikroppsproduktion. Dessutom kan detektionen av Borrelia-specifika antikroppar vara negativ trots att en infektion föreligger på grund av otillräcklig standardisering och låg känslighet hos ELISA- och immunoblot-tester. Här kan

Borrelia EliSpot-testet ofta täppa till det diagnostiska gapet.


Borrelia EliSpot kan lösa några av dessa problem

  • Testet återspeglar den aktuella aktiviteten hos patogenen vid både kroniska och färska/akuta infektioner med Borrelia burgdorferi (obs: influensa eller sommarinfluensa efter fästingbett).
  • EliSpot är mycket känsligt och kan upptäcka även en enda T-cell som reagerar på Borrelia burgdorferi. Med detektionsgränser på upp till en cell på 100.000 är EliSpot ett av de känsligaste cellulära testerna som finns.
  • EliSpot är mellan 20 och 200 gånger känsligare än ett konventionellt ELISA-test för antikroppar.
  • EliSpot är lika känsligt som ett RT-PCR-test (Real Time PCR), men den upptäcker patogenproteinet istället för mRNA (eng. messenger-RNA, Boten-RNA).
  • EliSpot kan vara till hjälp vid övervakning av behandlingar. Det bör vanligtvis vara negativt 4 till 8 veckor efter det att en effektiv behandling har avslutats.

Borrelia EliSpot

T-cell spot / gamma interferon test, IGRA: Interferon-gamma release assay

Borrelia EliSpot-antigener:

  • Borrelia burgdorferi full antigen: Borrelia burgdorferi B31 referensstam (Borrelia burgdorferi sensu stricto)
  • Borrelia burgdorferi peptidblandning: OspA från Borrelia b. sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC native + DbpA rekombinant
  • Borrelia burgdorferi LFA-1 (lymfocytfunktionsantigen 1): Kroppens eget protein + Borrelia burgdorferi sensu stricto (”delad epitop”). Förekommer ofta i samband med autoimmuna sjukdomar: t.ex. kollagenoser, reumatoid artrit, vaskulit (ANA, CCP-antikroppar, ANCA)

Förklaring: native = odlade antigener / rekombinanta: framställda med hjälp av genteknik

Reflekterar den aktuella T-cellulära aktiviteten hos Borrelia:

  • Ett positivt EliSpot-testresultat efter avslutad behandling kan tyda på en fortsatt aktiv infektion med Borrelia burgdorferi
  • T-cell spot/IGRA godkändes av den amerikanska läkemedelsmyndigheten (FDA) i maj 2011 för analys av Mycobacterium tuberculosis:
    ”... Ett positivt testresultat indikerar att infektion är sannolik. Ett negativt resultat indikerar att infektion är osannolik ..."

    ”...testresultaten kan vara tillgängliga inom 24 timmar...”

EliSpot som ett nytt T-cellstest är nästa banbrytande steg i diagnostiken av Lyme borrelios:

  • EliSpots sensitivitet uppskattas till 84% och specificiteten till 94%.
  • EliSpot-testerna ger tillförlitliga och mycket reproducerbara resultat.
  • EliSpot-undersökningar kan mätas under behandlingens gång för att få ytterligare information i efterföljande tester.
  • EliSpot och CD57-cellräkning kompletterar varandra när det gäller att förstå T-cellsmedierade immunsvar in vivo.

Huvudartikel i ”Clinical Infectious Diseases Journal”Journal"

Vetenskaplig artikel som handlar om bestämning av IFN-γ-utsöndring från T-celler isolerade före och efter framgångsrik behandling av en akut Borrelia-infektion.
Ladda ner

Referenser:

Lehman PV et al.: Unique Strengths of EliSpot for T Cell Diagnostics in: Kalyuzhny AE. Handbook of EliSpot: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 792. 2nd Ed: Springer; 2012: 3-23