Tests

EliSpot

EliSpot este o tehnologie utilizată pentru a evalua răspunsul imun funcțional al celulelor T la diferite antigene prin teste de tip enzimo-imunospot.

Eli Spot lyme coinfections plate washing

Opțiuni de diagnostic cu EliSpot

Laboratorul nostru utilizează EliSpot ca una dintre tehnologiile noastre esențiale pentru a măsura imunitatea celulară și a ajuta la diagnosticarea diferitelor infecții greu de detectat.

Un spectru larg de boli testabile:

EliSpot permite examinarea unei varietăți de infecții și patogeni, inclusiv agenți bine cunoscuți precum Ehrlichia și Anaplasma, Bartonella, Babesia, precum și infecții virale cauzate de virusul Epstein-Barr (EBV), virusul herpes simplex, citomegalovirusul și altele.

O înțelegere profundă a sistemului imunitar:

Prin măsurarea răspunsului imun celular, EliSpot nu doar că oferă posibilitatea de a monitoriza eficacitatea terapiei, ci și furnizează informații despre răspunsurile imunologice mediate de celulele T în diverse infecții. Sensibilitatea și specificitatea sa ridicată îl fac un instrument valoros în diagnosticul și monitorizarea bolilor infecțioase.

EliSpot – Un instrument versatil în diagnosticul bolilor infecțioase:

Laboratorul nostru utilizează tehnologia EliSpot pentru a diagnostica și monitoriza o gamă largă de infecții. Datorită aplicabilității sale largi și a capacității de a captura precis răspunsul imun celular, EliSpot contribuie semnificativ la diagnosticul și tratamentul precis al bolilor infecțioase.

EliSpot pentru Borrelia poate elimina unele probleme

  • Testul reflectă activitatea actuală a Borrelia burgdorferi în infecțiile cronice și recente cu Borrelia burgdorferi.
  • EliSpot este extrem de sensibil și poate detecta chiar și o singură celulă T reactivă la Borrelia burgdorferi. Cu niveluri de detecție care pot fi de până la o celulă din 100.000, EliSpot este unul dintre cele mai sensibile teste celulare disponibile.
  • EliSpot este de 20 până la 200 de ori mai sensibil decât un ELISA convențional.
  • EliSpot prezintă o sensibilitate similară cu analiza RT-PCR (Real Time PCR), dar detectează proteina secretată în locul mRNA-ului (ARN mesager).
  • EliSpot poate fi util în monitorizarea terapiilor. EliSpot ar trebui să devină, de obicei, negativ la aproximativ 4 până la 8 săptămâni după finalizarea unei terapii eficiente.

Ce poate fi testat cu EliSpot?

Borelioză Lyme
Ehrlichia & Anaplasma
Bartonella
Babesia
Chlamydia pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Mycoplasma
Yersinia
Rickettsia
Epstein-Barr-Virus (EBV)
Herpes simplex Virus (HSV)
Cytomegalovirus (CMV)
Varicella zoster virus (VZV)
HHV6-Virus
HHV7-Virus
Candida albicans
Aspergillus Peptid

Boala Lyme

Infecțiile cu Borrelia burgdorferi nu numai că provoacă un răspuns imun umoral sub formă de producție de anticorpi specifici pentru Borrelia, dar activează concomitent răspunsul imun celular sub formă de limfocite T specifice (testul EliSpot). Odată ce Borrelia nu mai sunt active în organism, răspunsul imun celular T ar trebui să scadă prompt, rezultând un test EliSpot negativ.

În general, nu este posibil să se evalueze succesul tratamentului unei terapii eficiente pentru boala Lyme folosind anticorpii Borrelia, deoarece „titrul“ anticorpilor în sânge poate persista ani de zile. Infecțiile recent dobândite cu Borrelia burgdorferi (de exemplu, simptome de eritem migrator sau gripă de vară după mușcătura de căpușă) se manifestă adesea săptămâni mai târziu sub formă de producție de anticorpi. În plus, detectarea anticorpilor specifici Borrelia poate oferi rezultate negative în ciuda unei infecții reale din cauza standardizării insuficiente și a sensibilității scăzute a testelor ELISA și imunoblot. În astfel de cazuri, testul Borrelia EliSpot poate adesea să acopere lacunele diagnostice.

Testul Borrelia EliSpot poate aborda unele dintre aceste probleme.

  • Testul reflectă activitatea actuală a patogenului atât în infecțiile cronice, cât și în cele proaspete/acute (Notă: eritem migrator sau gripă de vară după mușcătura de căpușă) cu Borrelia burgdorferi.
  • EliSpot este extrem de sensibil și poate detecta chiar și o singură celulă T care răspunde la Borrelia burgdorferi. Cu limite de detectare care ajung până la o celulă din 100.000, EliSpot este una dintre cele mai sensibile metode de testare celulară disponibile.
  • EliSpot este de 20 până la 200 de ori mai sensibil decât un test ELISA obișnuit pentru anticorpi.
  • Prin urmare, EliSpot este similar de sensibil cu un test RT-PCR (Real Time PCR), dar detectează proteina patogenului în locul mRNA-ului (ARN mesager).
  • EliSpot poate fi util în monitorizarea terapiilor. Ar trebui să devină, de obicei, negativ la 4 până la 8 săptămâni după finalizarea unei terapii eficiente.

Borrelia EliSpot

T-Cell-Spot / IGRA: Test de eliberare a interferonului-gamma

Antigenele Borrelia EliSpot:

Antigen complet Borrelia burgdorferi: Strainul de referință Borrelia burgdorferi B31 (Borrelia burgdorferi sensu stricto)

Mix de peptide Borrelia burgdorferi: OspA din Borrelia b. sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC nativ + DbpA recombinat

Borrelia burgdorferi LFA-1 (Antigenul de Funcție al Limfocitelor 1): Proteină propriu-zisă + Borrelia burgdorferi sensu stricto (epitop comun). Adesea asociat cu boli autoimune: colagenoze, artrită reumatoidă, vasculită (ANA, anticorpi CCP, ANCA)

Explicație: Nativ = antigene cultivate / Recombinat: produs prin tehnologie genetică

Reflectând activitatea actuală celulară T a bolii Lyme:

  • Indicație pentru o infecție activă cu Borrelia burgdorferi în cazurile în care testul EliSpot rămâne pozitiv după finalizarea terapiilor
  • T-Cell-Spot/IGRA a fost aprobat de FDA în mai 2011 pentru M. tuberculosis: „… Un rezultat pozitiv sugerează că o infecție este probabilă, un rezultat negativ sugerează că o infecție este improbabilă…” „…Rezultatele pot fi disponibile în termen de 24 de ore…”

EliSpot: Nou test T-Cell un „Schimbător de joc“ pentru boala Lyme:

  • Sensibilitatea EliSpot este estimată la 84%, iar specificitatea la 94%.
  • Teste EliSpot oferă date robuste și extrem de reproducibile.
  • EliSpot poate fi retestat pentru obținerea de informații suplimentare în testele de urmărire.
  • Cele două sisteme de testare (EliSpot + numărătoare de celule CD57) se completează reciproc în căutarea înțelegerii imunității mediate de celulele T in vivo.

Main article in the "Clinical Infectious Diseases Journal"

Scientific article addressing the determination of IFN-γ secretion from T cells isolated before and after successful treatment of an acute Borrelia infection.
Descărcare

Referințe:

Lehman PV et al.: Unique Strengths of EliSpot for T Cell Diagnostics in: Kalyuzhny AE. Handbook of EliSpot: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 792. 2nd Ed: Springer; 2012: 3-23