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EliSpot

EliSpot es una tecnología utilizada para evaluar la respuesta inmune funcional de las células T frente a varios antígenos mediante ensayos de manchas inmunoenzimáticas.

Eli Spot lyme coinfections plate washing

Opciones diagnósticas con EliSpot

Nuestro laboratorio emplea EliSpot como una de nuestras tecnologías clave para medir la inmunidad celular y ayudar en el diagnóstico de diversas infecciones difíciles de detectar.

Un amplio espectro de enfermedades diagnosticables:

EliSpot permite examinar una variedad de infecciones y patógenos, incluidos agentes bien conocidos como Ehrlichia y Anaplasma, Bartonella, Babesia, así como infecciones virales causadas por el virus de Epstein-Barr (EBV), el virus del herpes simple, citomegalovirus y otros.

Una visión profunda del sistema inmunológico:

Al medir la respuesta inmune celular, EliSpot no solo ofrece la posibilidad de monitorear la eficacia de las terapias, sino que también proporciona información sobre las respuestas inmunes mediadas por células T en una variedad de infecciones. Su alta sensibilidad y especificidad lo convierten en una herramienta valiosa en el diagnóstico y seguimiento de enfermedades infecciosas.

EliSpot – Una herramienta versátil en el diagnóstico de enfermedades infecciosas:

Nuestro laboratorio utiliza la tecnología EliSpot para diagnosticar y monitorear una amplia gama de infecciones. Debido a su amplia aplicabilidad y su capacidad para captar con precisión la respuesta inmune celular, EliSpot contribuye significativamente al diagnóstico y tratamiento preciso de enfermedades infecciosas.

El EliSpot de Borrelia puede eliminar algunos problemas.

  • Refleja la actividad actual de Borrelia burgdorferi en infecciones crónicas y recientes.
  • El EliSpot es altamente sensible y puede detectar incluso una sola célula T reactiva a Borrelia burgdorferi. Con niveles de detección de hasta una célula en 100.000, es uno de los ensayos celulares más sensibles disponibles.
  • El EliSpot es entre 20 y 200 veces más sensible que un ELISA convencional.
  • Muestra una sensibilidad similar a la de un análisis RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real), pero detecta la proteína secretada en lugar del ARNm (ARN mensajero).
  • Puede ser útil para monitorear terapias. Generalmente, el EliSpot debería volverse negativo entre 4 y 8 semanas después de completar una terapia efectiva.

¿Qué se puede testar con el EliSpot?

Borreliosis de Lyme
Ehrlichia & Anaplasma
Bartonella
Babesia
Chlamydia pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Mycoplasma
Yersinia
Rickettsia
Epstein-Barr-Virus (EBV)
Virus del Herpes simple (VHS)
Cytomegalovirus (CMV)
Virus varicela-zóster (VZV)
Virus-VHH6
Virus-VHH7
Candida albicans
Aspergillus Peptid

Enfermedad de Lyme

Las infecciones con Borrelia burgdorferi no solo provocan una respuesta inmune humoral en forma de producción de anticuerpos específicos contra Borrelia, sino que también activan simultáneamente la respuesta inmune celular en forma de linfocitos T específicos (prueba EliSpot). Una vez que Borrelia ya no está activa en el cuerpo, la respuesta inmune celular debería disminuir rápidamente, resultando en una prueba EliSpot negativa.

En general, no es posible evaluar el éxito del tratamiento de una terapia efectiva para la enfermedad de Lyme utilizando anticuerpos contra Borrelia, ya que el "título" de anticuerpos en la sangre puede persistir durante años. Las infecciones recientes con Borrelia burgdorferi (por ejemplo, síntomas de eritema migratorio o gripe estival después de una picadura de garrapata) a menudo se manifiestan semanas después en forma de producción de anticuerpos. Además, la detección de anticuerpos específicos contra Borrelia puede dar resultados negativos a pesar de una infección real debido a una estandarización inadecuada y baja sensibilidad de las pruebas ELISA e inmunoblot. En tales casos, la prueba EliSpot de Borrelia a menudo puede cerrar la brecha diagnóstica.

El EliSpot de Borrelia puede abordar algunos de estos problemas.

  • La prueba refleja la actividad actual del patógeno en infecciones crónicas y recientes/agudas (Nota: eritema migratorio o gripe estival después de una picadura de garrapata) con Borrelia burgdorferi.
  • El EliSpot es altamente sensible y puede detectar incluso una sola célula T que responde a Borrelia burgdorferi. Con límites de detección de hasta una célula en 100,000, el EliSpot es uno de los métodos de prueba celular más sensibles disponibles.
  • El EliSpot es entre 20 y 200 veces más sensible que una prueba de anticuerpos ELISA regular.
  • Por lo tanto, el EliSpot es igualmente sensible a una prueba RT-PCR (reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real), pero detecta la proteína del patógeno en lugar del ARNm (ARN mensajero).
  • El EliSpot puede ser útil para monitorear terapias. Generalmente, debería volverse negativo entre 4 y 8 semanas después de finalizar una terapia efectiva.

EliSpot de Borrelia

T-Cell-Spot / IGRA: Ensayo de Liberación de Interferón-Gamma

Antígenos de Borrelia EliSpot:

  • Antígeno completo de Borrelia burgdorferi: Cepa de referencia B31 (Borrelia burgdorferi sensu stricto).
  • Mezcla de péptidos de Borrelia burgdorferi: OspA de Borrelia b. sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC nativo + DbpA recombinante.
  • LFA-1 de Borrelia burgdorferi (Antígeno de Función Linfocitaria 1): Proteína del propio cuerpo + Borrelia burgdorferi sensu stricto (epítopo compartido). A menudo asociado con enfermedades autoinmunes: colagenosis, artritis reumatoide, vasculitis (ANA, anticuerpos CCP, ANCA).

Explicación: Nativo = antígenos cultivados / Recombinante = producido por tecnología genética.

Reflejando la actividad celular actual en la enfermedad de Lyme:

  • Indicación de una infección activa actual de Borrelia burgdorferi en casos de EliSpot positivo tras el final de las terapias.
  • T-Cell-Spot/IGRA ha sido aprobado por la FDA en mayo de 2011 para M. tuberculosis: "... Un resultado positivo sugiere que es probable una infección, un resultado negativo sugiere que es poco probable una infección..." "... Los resultados pueden estar disponibles en 24 horas..."

EliSpot: Nueva prueba de células T, un “cambio de juego” para la enfermedad de Lyme:

  • La sensibilidad del EliSpot se estima en un 84%, y la especificidad en un 94%.
  • Los ensayos EliSpot proporcionan datos robustos y altamente reproducibles.
  • EliSpot puede ser reevaluado para adquirir información adicional en ensayos de seguimiento.
  • Los dos sistemas de ensayo (EliSpot + conteo de células CD57) se complementan en el intento de comprender la inmunidad mediada por células T in vivo.

Main article in the "Clinical Infectious Diseases Journal"

Main article in the "Clinical Infectious Diseases Journal"
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Referencias:

Lehman PV et al.: Unique Strengths of EliSpot for T Cell Diagnostics in: Kalyuzhny AE. Handbook of EliSpot: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 792. 2nd Ed: Springer; 2012: 3-23