Tests
iSpot
i-Spot-testet analyserar T-cellssvar för att ge insikter i det cellulära immunsystemet som är avgörande för diagnos av kroniska och opportunistiska infektioner. Det mäter cytokinerna IFN-γ och IL2 och är relevant för olika infektionssjukdomar, inklusive borrelia, anaplasma och SARS-CoV-2. Målet är att sätta en ny diagnostisk standard.
T-cellsimmunitet med iSpot-analys
T-celler
T-cellernas huvudsakliga funktion är att stimulera B-celler genom att frisätta specifika och ospecifika cytokiner som IFN-γ och IL2.
En antigen är ett (vanligtvis främmande) ämne som reagerar med en antikropp och kan utlösa ett immunsvar. En stor struktur, t.ex. ett protein, ett virus eller en bakterie, innehåller många underregioner som representerar de faktiska antigenbestämningarna eller epitoperna. Dessa epitoper kan bestå av peptider, kolhydrater eller vissa lipider som har rätt storlek och tredimensionell konfiguration för att uppta bindningsstället hos en antikroppsmolekyl eller en T-cellsreceptor. När antigenet kommer in i kroppen binds det till antikroppsmolekylen och en T-cellsreceptor (virus binds starkare till antikroppsmolekylen och bakterier till T-cellsreceptorn) och T-cellerna stimulerar B-cellerna genom att avge specifika och ospecifika cytokiner.
iSpot-analys
iSpot Assay (Enzyme-linked Immuno-Spot Assay) kan upptäcka T-cellssvar på encellsnivå och därmed karakterisera immunsvaret hos de testade individerna. Visualiseringen av utsöndrade cytokiner som produceras av T-celler som stimuleras med specifika antigener ger en differentierad bild av immunsvaret för att övervaka sjukdomsprogression och för att fastställa cellulär immunitet efter infektion.
IFN-γ och IL2
iSpot-testet baseras på variabiliteten i korrelationen med antalet aktiverade T-celler eller utsöndrade IFN-γ och IL2.
Cytokinen IL-2
IL-2 är en 15,5 kDa-cytokin som utsöndras av antigenaktiverade T-celler. IL-2 identifierades ursprungligen som en tillväxtfaktor för T-celler, men är nu känd för att ha en mängd olika effekter, inklusive förmågan att öka den cytolytiska aktiviteten hos NK eller lymfokinaktiverade mördarceller, öka den cytolytiska aktiviteten hos tumörinfiltrerande lymfocyter (TIL), öka produktionen av immunglobuliner och öka produktionen av immunglobuliner, öka produktionen av immunoglobuliner hos aktiverade B-celler, upprätthålla den homeostatiska proliferationen av regulatoriska T-celler, verka på medfödda lymfoida celler, modulera differentieringen av effektor-T-celler och verka på minnes-T-celler, effektor-T-celler och monocyter. I allmänhet representerar IL-2 immunsystemets minnesfunktion och därmed konvalescens.
Cytokinen IFN-γ
IFN-γ har visat sig vara en extremt mångsidig cytokin som kan utöva otaliga biologiska aktiviteter som inte är överflödiga med andra interferoner. IFN-γ är associerat med akut eller aktiv infektion. Litteraturen är full av rapporter som betonar dess betydelse i sjukdomspatologier. Följaktligen innebär varje störning av IFN-γ-IFN-γR-systemet en betydande försämring av värdens immunsvar mot infektioner. Därför är dess betydelse för skyddande immunitet vid infektionssjukdomar och cancer obestridlig.
Patogener har utvecklat ett stort antal strategier för att övervinna den hämmande effekten av IFN-γ och kringgå det skydd som IFN-γ ger. IFN-γ är förknippat med akut eller aktiv infektion, medan IL-2 är förknippat med immunsystemets minnesfunktion och därmed med konvalescens.
Förhållandet mellan IFN-γ- och IL-2-svaret möjliggör ett differentierat uttalande om immunstatusen under och efter en infektion. iSpot 2-Color EliSpot Assay är därför en universell lösning för att bestämma immunstatus vid både aktiva och tidigare infektioner.
Den enzymbundna immuno-spot assay-tekniken ser ut att bli den nya standarden för olika tillämpningar inom området infektionssjukdomar, för frågor inom autoimmunologi, för transplantationsdiagnostik, övervakning av allergiterapi och för vaccinationsstudier.
Vad kan man testa med iSpot?
Referenser:
Mitra S, Leonard WJ. Biology of IL-2 and its therapeutic modulation: Mechanisms and strategies. J Leukoc Biol. 2018 Apr;103(4):643-655. doi: 10.1002/JLB.2RI0717-278R . Epub 2018 Mar 9. PMID: 29522246 .
Kak, Gunjan, Raza, Mohsin and Tiwari, Brijendra K. "Interferon-gamma (IFN-γ): Exploring its implications in infectious diseases" Biomolecular Concepts, vol. 9, no. 1, 2018, pp. 64-79.
Janetzki, S., M. Rueger, and T. Dillenbeck, Stepping up ELISpot: Multi-Level Analysis in FluoroSpot Assays. Cells, 2014. 3(4): p. 1102-15.
