Tests
iSpot
Le test i-Spot analyse les réactions des cellules T pour fournir des informations sur le système immunitaire cellulaire, essentiel pour diagnostiquer les infections chroniques et opportunistes. Il mesure les cytokines IFN-γ et IL2, et est pertinent pour diverses maladies infectieuses, y compris la Borrelia, l'Anaplasma et le SARS-CoV-2. Son objectif est d'établir une nouvelle norme diagnostique.
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L'immunité des cellules T avec le test iSpot
Cellules T
La fonction principale des cellules T est de stimuler les cellules B en fournissant des cytokines spécifiques et non spécifiques comme l'IFN-γ et l'IL2.
Un antigène est une substance (généralement étrangère) qui réagit avec un anticorps et peut stimuler une réponse immunitaire. Une grande structure, telle qu'une protéine, un virus ou une bactérie, contient de nombreuses sous-régions qui sont les véritables déterminants antigéniques ou épitopes. Ces épitopes peuvent être constitués de peptides, de glucides ou de lipides particuliers de taille et de configuration tridimensionnelle appropriées pour occuper le site de liaison d'une molécule d'anticorps ou d'un récepteur de cellule T. Ainsi, lorsque l'antigène pénètre dans le corps, il se fixe à la molécule d'anticorps et au récepteur de cellule T (les virus se fixent plus fortement aux molécules d'anticorps et les bactéries aux récepteurs de cellules T), les cellules T stimulent les cellules B en fournissant des cytokines spécifiques et non spécifiques.
iSpot Assay
Le test i-Spot (Enzyme-linked Immuno-Spot Assay) est capable de détecter les réponses des cellules T au niveau des cellules uniques et caractérise ainsi la réponse immunitaire des individus testés. La visualisation des cytokines sécrétées par les cellules T, stimulées avec des antigènes spécifiques, fournit une image différenciée de la réponse immunitaire pour surveiller la progression de la maladie et déterminer l'immunité cellulaire après l'infection.
IFN-γ and IL2
Le test i-Spot repose sur la variabilité en corrélation avec le nombre de cellules T activées et, respectivement, les niveaux sécrétés d'IFN-γ et d'IL2.
La cytokine IL-2
L'IL-2 est une cytokine de 15,5 kDa sécrétée par les cellules T activées par des antigènes. Identifiée à l'origine comme un facteur de croissance des cellules T, l'IL-2 est désormais connue pour avoir un large éventail d'actions, y compris la capacité de stimuler l'activité cytolytique des cellules NK ou des cellules tueuses activées par les lymphokines, d'augmenter l'activité cytolytique des lymphocytes infiltrant les tumeurs (TILs), de renforcer la production d'immunoglobulines par les cellules B activées, de maintenir la prolifération homéostatique des cellules T régulatrices, d'agir sur les cellules lymphoïdes innées, et de moduler la différenciation des cellules T effectrices, ainsi que d'avoir des effets sur les cellules T mémoire, les cellules T effectrices et les monocytes. En général, l'IL-2 représente la fonction mémoire du système immunitaire et donc la convalescence.
La cytokine IFN-γ
L'IFN-γ est devenu une cytokine extrêmement polyvalente capable de réaliser de nombreuses activités biologiques qui ne se chevauchent pas avec celles d'autres interférons. L'IFN-γ est associé à une infection aiguë ou active. La littérature regorge de rapports soulignant son importance dans les pathologies des maladies. Par conséquent, tout échec dans le système IFN-γ-IFN-γR compromet gravement les réponses immunitaires de l'hôte aux infections. Ainsi, sa pertinence en ce qui concerne la protection immunitaire dans les maladies infectieuses et les cancers est indéniable. De nombreuses stratégies d'évasion ont été mises en place par les pathogènes pour surmonter ses effets inhibiteurs et contourner la protection conférée par l'IFN-γ. L'IFN-γ est associé à une infection aiguë ou active, tandis que l'IL-2 représente la fonction mémoire du système immunitaire et donc la convalescence.
La relation entre la réponse à l'IFN-γ et à l'IL-2 permet de donner une déclaration différenciée sur le statut immunitaire pendant et après l'infection. Ainsi, le test i-Spot à deux couleurs EliSpot est une solution universelle pour déterminer le statut immunitaire aussi bien pour les infections actives que pour celles présentes depuis plus longtemps.
La technique de l'Enzyme-linked Immuno-Spot Assay promet d'être la nouvelle norme en or pour diverses applications dans le domaine des maladies infectieuses, pour les questions en auto-immunologie, pour les diagnostics de transplantation, l'allergie (suivi thérapeutique) et les études sur les vaccins.
Références:
Mitra S, Leonard WJ. Biology of IL-2 and its therapeutic modulation: Mechanisms and strategies. J Leukoc Biol. 2018 Apr;103(4):643-655. doi: 10.1002/JLB.2RI0717-278R . Epub 2018 Mar 9. PMID: 29522246 .
Kak, Gunjan, Raza, Mohsin and Tiwari, Brijendra K. "Interferon-gamma (IFN-γ): Exploring its implications in infectious diseases" Biomolecular Concepts, vol. 9, no. 1, 2018, pp. 64-79.
Janetzki, S., M. Rueger, and T. Dillenbeck, Stepping up ELISpot: Multi-Level Analysis in FluoroSpot Assays. Cells, 2014. 3(4): p. 1102-15.