Tests

iSpot

El test iSpot analiza las células T y la secreción de IFN-γ/IL2 para obtener información sobre la inmunidad celular en infecciones crónicas.

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La inmunidad de células T con el ensayo iSpot

Células T

La función principal de las células T es estimular las células B al proporcionar citoquinas específicas y no específicas como IFN-γ e IL2.

Un antígeno es una sustancia (generalmente extraña) que reacciona con un anticuerpo y puede estimular una respuesta inmunitaria. Una estructura grande, como una proteína, un virus o una bacteria, contiene muchas subregiones que son los determinantes antigénicos o epítopos reales. Estos epítopos pueden consistir en péptidos, carbohidratos o ciertos lípidos de tamaño y configuración tridimensional correctos para encajar en el sitio de unión de una molécula de anticuerpo o un receptor de células T. Así que, cuando el antígeno entra en el cuerpo, se conecta a la molécula de anticuerpo y a un receptor de células T (los virus se conectan más fuertemente a las moléculas de anticuerpos y las bacterias con receptores de células T), las células T estimulan las células B al proporcionar citoquinas específicas y no específicas.

iSpot Assay

El ensayo i-Spot (Enzyme-linked Immuno-Spot Assay) es capaz de detectar las respuestas de las células T a nivel de células individuales y, por lo tanto, caracteriza la respuesta inmunitaria de los individuos evaluados. La visualización de las citoquinas secretadas por las células T, estimuladas con antígenos específicos, proporciona una imagen diferenciada de la respuesta inmunitaria para monitorear la progresión de la enfermedad y determinar la inmunidad celular después de la infección.

IFN-γ and IL2

El test i-Spot se basa en la variabilidad en correlación con el número de células T activadas y, respectivamente, la secreción de IFN-γ e IL2.

La citoquina IL-2

La IL-2 es una citoquina de 15.5 kDa secretada por células T activadas por antígenos. Originalmente identificada como un factor de crecimiento de células T, la IL-2 ahora se sabe que tiene una amplia gama de acciones, incluyendo la capacidad de potenciar la actividad citolítica de las células NK o las células asesinas activadas por linfocinas, aumentar la actividad citolítica de los linfocitos infiltrantes de tumores (TILs), aumentar la producción de inmunoglobulinas por células B activadas, mantener la proliferación homeostática de células T reguladoras, actuar sobre células linfoides innatas y modular la diferenciación de células T efectoras, así como tener acciones sobre células T de memoria, células T efectoras y monocitos. En general, la IL-2 representa la función de memoria del sistema inmunitario y, por lo tanto, una convalecencia.

La citoquina IFN-γ

El IFN-γ ha surgido como una citoquina extremadamente versátil que puede llevar a cabo innumerables actividades biológicas que no se superponen con otros interferones. El IFN-γ está asociado con una infección aguda o activa. La literatura está inundada de informes que enfatizan su importancia en las patologías de enfermedades. En consecuencia, cualquier falla en el sistema IFN-γ-IFN-γR dificulta gravemente las respuestas inmunitarias del huésped a las infecciones. Por lo tanto, su relevancia en la concesión de inmunidad protectora en enfermedades infecciosas y cánceres es indiscutible. Numerosas estrategias evasivas han sido ideadas por los patógenos para superar sus efectos inhibitorios y eludir la protección conferida por el IFN-γ. El IFN-γ está asociado con una infección aguda o activa, mientras que la IL-2 representa la función de memoria del sistema inmunitario y, por lo tanto, representa la convalecencia.

La relación entre la respuesta de IFN-γ e IL-2 permite una declaración diferenciada sobre el estado inmunitario durante y después de la infección. Así, el ensayo i-Spot de 2 colores EliSpot es una solución universal para determinar el estado inmunitario tanto en infecciones activas como en el caso de una infección que ha estado presente durante un período prolongado.

La técnica del Enzyme-linked Immuno-Spot Assay promete ser el nuevo estándar de oro para diferentes aplicaciones en el campo de las enfermedades infecciosas, para cuestiones en autoimmunología, para diagnósticos de trasplante, alergias (monitoreo de terapia) y estudios de vacunación.

¿Qué se puede analizar con el iSpot?

Borreliosis de Lyme
Ehrlichia & Anaplasma
Bartonella
Babesia
Chlamydia pneumoniae
Chlamydia trachomatis
Mycoplasma
Yersinia
Rickettsia
Long Covid
Virus del Herpes simple (VHS)
Virus varicela-zóster (VZV)
Virus-VHH6
Virus-VHH7
Candida albicans
Aspergillus Peptid

Referencias:

Mitra S, Leonard WJ. Biology of IL-2 and its therapeutic modulation: Mechanisms and strategies. J Leukoc Biol. 2018 Apr;103(4):643-655. doi: 10.1002/JLB.2RI0717-278R . Epub 2018 Mar 9. PMID: 29522246 .

Kak, Gunjan, Raza, Mohsin and Tiwari, Brijendra K. "Interferon-gamma (IFN-γ): Exploring its implications in infectious diseases" Biomolecular Concepts, vol. 9, no. 1, 2018, pp. 64-79.

Janetzki, S., M. Rueger, and T. Dillenbeck, Stepping up ELISpot: Multi-Level Analysis in FluoroSpot Assays. Cells, 2014. 3(4): p. 1102-15.