iSpot

Celulele T

Funcția principală a celulelor T este de a stimula celulele B prin furnizarea de cytokine specifice și nespecifice, cum ar fi IFN-γ și IL2.

Un antigen este o substanță (de obicei străină) care reacționează cu un anticorp și poate stimula o răspuns imun. O structură mare, cum ar fi o proteină, virus sau bacterie, conține multe subregiuni care sunt determinanții antigenici sau epitopi. Acești epitopi pot consta din peptide, carbohidrați sau lipide particulare de dimensiunea și configurația tridimensională corecte pentru a umple locul de legare al unei molecule de anticorp sau al unei receptori T-celulari. Astfel, atunci când antigenul pătrunde în corp, se leagă de molecula de anticorp și de receptorul T-celular (virusurile se leagă mai puternic de moleculele de anticorpi, iar bacteriile cu receptorii T-celulari), celulele T stimulează celulele B prin furnizarea de cytokine specifice și nespecifice.

iSpot Assay

Testul iSpot (Enzyme-linked Immuno-Spot Assay) este capabil să detecteze răspunsurile celulelor T la nivelul celulelor individuale și, astfel, caracterizează răspunsul imun al indivizilor testați. Vizualizarea cytokinelelor secretate de celulele T, stimulate cu antigeni specifici, oferă o imagine diferențiată a răspunsului imun pentru a monitoriza progresia bolii și a determina imunitatea celulară după infecție.

Testul i-Spot se bazează pe variabilitatea în corelație cu numărul de celule T activate și, respectiv, cu IFN-γ și IL2 secretate.

Citozina IL-2

IL-2 este o citozină de 15,5 kDa secretată de celulele T activate de antigen. Identificată inițial ca un factor de creștere pentru celulele T, IL-2 este acum cunoscută pentru gama largă de acțiuni, inclusiv capacitatea de a stimula activitatea citolitică a celulelor NK sau a celulelor ucigașe activate de limfokine, de a crește activitatea citolitică a limfocitelor infiltrative tumorale (TIL), de a augmenta producția de imunoglobuline de către celulele B activate, de a menține proliferarea homeostatică a celulelor T regulatorii, de a acționa asupra celulelor limfoide înnăscute și de a modula diferențierea celulelor T efectori, precum și de a avea acțiuni asupra celulelor T de memorie, celulelor T efectori și monocitelor. În general, IL-2 reprezintă funcția de memorie a sistemului imunitar și, astfel, recuperarea.

Citozina IFN-γ

IFN-γ a apărut ca o citozină extrem de versatilă care poate îndeplini numeroase activități biologice care nu sunt redundante cu alte interferone. IFN-γ este asociat cu o infecție acută sau activă. Literatura este inundată de rapoarte care subliniază importanța sa în patologiile bolilor. În consecință, orice eșec în sistemul IFN-γ-IFN-γR împiedică grav răspunsurile imune ale gazdei la infecții. Astfel, relevanța sa în ceea ce privește conferirea imunității protective în bolile infecțioase și cancer este indiscutabilă. Numeroase strategii de evitare au fost elaborate de patogeni pentru a depăși efectele sale de limitare și pentru a eluda protecția conferită de IFN-γ. IFN-γ este asociat cu o infecție acută sau activă, în timp ce IL-2 reprezintă funcția de memorie a sistemului imunitar și, prin urmare, reprezintă recuperarea.

Relația dintre răspunsul IFN-γ și IL-2 permite o declarație diferențiată despre starea imunității în timpul și după infecție. Astfel, testul i-Spot cu 2 culori EliSpot este o soluție universală pentru determinarea stării imune atât pentru infecțiile active, cât și pentru infecțiile care sunt prezente de o perioadă mai lungă de timp.

Tehnica Enzyme-linked Immuno-Spot Assay promite să devină noul standard de aur pentru diferite aplicații în domeniul bolilor infecțioase, pentru întrebări în autoimunologie, pentru diagnosticul transplanturilor, alergii (monitorizarea terapiei) și pentru studiile de vaccinare.