Lång Covid

Det cellulära immunsystemet, och i synnerhet T-cellerna, styr styrkan i immunsvaret genom att frisätta cytokiner för att öka eller undertrycka svaret beroende på virusbelastningen. Påvisandet av reaktiva T-celler (effektorceller) mot en patogen indikerar kontakt och därmed en akut eller tidigare infektion, oavsett om antikroppar har producerats eller inte.

Det är särskilt intressant att T-cellsreaktionerna mot SARS-CoV kan påvisas som antikroppstitrar under en längre tidsperiod.

EliSpot-analysen (enzyme-linked immuno-spot assay) kan påvisa T-cellsreaktioner på encellsnivå och därmed karakterisera det individuella immunsvaret hos infekterade personer. Påvisandet av cytokinfrisättning från T-celler som stimulerats med specifika coronavirusantigener ger en differentierad bild av immunsvaret för att visualisera utvecklingen av sjukdomsförloppet och immuniteten efter en infektion.

The advantages of the SARS-CoV-2 iSpot:

• Effektiv, indirekt upptäckt av tidigare covid-19-sjukdom
• Differentierad bild av immunförsvaret för att visa utvecklingen av sjukdomsförloppet och immuniteten efter en infektion
• Modern cellulär testmetod för att skilja mellan influensa och COVID-19-infektioner
• Grundläggande cellulär immunitet mycket sannolik - fråga om grundläggande immunitet genom det cellulära immunsystemet efter tidigare kontakt med globalt endemiska coronavirus
• Om SARS-CoV-2-specifika T-cellskloner upptäcks är detta inte bara bevis på tidigare viruskontakt, fyndet kan också indikera befintlig cellulär immunitet

Ytterligare information om iSpot Det pandemiska utbrottet av SARS-CoV-2 och dess påverkan på den globala befolkningen visar på det stora behovet av testprocedurer som kan kartlägga infektionsförloppet. Den särskilda betydelsen ligger i de tillhörande diagnostiska, prognostiska och terapeutiska tillvägagångssätten. Komplett diagnostik som beaktar immunsystemets alla pelare är avgörande för att fastställa immuniteten mot SARS-CoV-2 så att riktade åtgärder kan sättas in i händelse av förnyade lokala utbrott i framtiden. Infektionen är kliniskt asymtomatisk eller måttlig hos de flesta av de drabbade. I vissa fall orsakar dock infektionen ett allvarligt förlopp som kan leda till döden. Förutom den etablerade RT-PCR för att bekräfta en akut infektion är detektion av det humorala immunsvaret mot SARS-CoV-2 en del av diagnosen. ELISA testsystem används för att upptäcka antikroppar. När det gäller eventuell immunitet och individuellt snabbt sjunkande antikroppstitrar är dessa dock föremål för stor debatt bland experter om deras giltighet. Det cellulära immunförsvaret kan testas som en ytterligare pelare i en komplett diagnos. Medan antikroppar fäster sig vid patogener som virus och bakterier och förstör dem, fäster sig T-celler vid sjuka celler i kroppen, t.ex. tumörceller eller virusinfekterade celler. T-celler hjälper också till att locka andra immunceller till området. CoV-iSpot, som utvecklats av AID, detekterar IFN-γ- och IL-2-svar från patogenspecifikt aktiverade T-celler mot SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2 peptidmix) och Coronaviridae i allmänhet (PAN-Corona peptidmix). SARS-CoV-2-peptidmixen som utvecklats av AID innehåller endast mycket specifika sekvenser av de immunodominanta epitoperna för SARS-CoV-2. För att skilja den från andra coronavirus ingår en andra peptidmix med specifika sekvenser av konserverade regioner inom Coronaviridae-familjen (PAN-Corona Peptide Mix) i CoV-iSpot. Detektion av reaktiva T-celler (effektorceller) mot en patogen, såsom SARS-CoV-2, indikerar kontakt och därför en akut eller tidigare infektion, oavsett om antikroppar bildades. Interferon gamma är en proinflammatorisk cytokin som huvudsakligen produceras av aktiverade T-celler och NK-celler. En frisättning av IFN-γ från effektorceller, som en ledande cytokin, indikerar ett TH1-dominerande immunsvar Interleukin 2 reglerar T-lymfocyternas aktiviteter. Det främjar aktivering och expansion av T-celler och differentiering av CD8+ T-celler till minnesceller. I CoV-iSpot tyder enbart upptäckten av IFN-γ-producerande effektorceller på ett immunsvar i samband med en SARS-CoV-2-infektion. Upptäckt IL-2 eller samtidig upptäckt av IFN-γ och IL-2 indikerar förekomst av minnesceller som en indikation på en tidigare SARS-CoV-2-infektion med möjlig cellulär immunitet.

Klinisk relevans

Det förvärvade immunförsvaret skiljer sig fundamentalt åt i det humorala och cellulära immunsvaret. Det cellulära immunsvaret är T-cellsberoende. T-cellerna är indelade i olika subpopulationer (t.ex. Th1 och Th2), som frisätter olika cytokiner beroende på deras funktion. Vissa av dessa cytokiner utlöser det humorala immunförsvaret. T-cellerna står därför i början av de förvärvade försvarsmekanismerna. De olika subpopulationerna av T-celler utgör centrum för både det humorala och det cellulära immunsvaret.

Effektor-T-celler är direkt aktiverade och differentierade T-celler som har proinflammatoriska egenskaper. De bildas av naiva T-celler efter att de har kommit i kontakt med motsvarande antigen under en infektion eller vaccination. Efter differentiering förökar de sig till patogenspecifika T-cellskloner, som återfinns som effektor- och minnes-T-celler i det perifera blodet. Regulatoriska T-celler undertrycker immunsvaret. Liksom effektor-T-celler genereras de genom differentiering från naiva T-celler. En balans mellan aktiverade effektor-T-celler och regulatoriska T-celler är avgörande för ett effektivt och skyddande immunsvar. En störd balans kan ligga till grund för en autoimmun sjukdom eller en kronisk inflammatorisk process.

EliSpot-metoden ger möjlighet att få en inblick i dessa reglerande processer. Den kan användas på många olika sätt och kan användas för att visualisera både akuta sjukdomar och kroniska inflammatoriska processer. Terapiövervakning är också möjlig.

Indikationer:

Indirekt upptäckt av en tidigare COVID-19-sjukdom

Särskilt hos asymtomatiska patienter eller patienter med milda symtom finns det ofta inga eller bara låga antikroppstitrar, som ofta sjunker snabbt igen. Många människor förinta redan coronaviruset genom sitt cellulära immunsystem innan antikroppar produceras. Genom att upptäcka SARS-CoV-2-specifika T-effektor- eller minnesceller kan tidigare COVID-19-infektioner effektivt upptäckas.

Bevis på cellulär immunitet

Om SARS-CoV-2-specifika T-cellskloner kan påvisas är detta inte bara ett bevis på tidigare viruskontakt, utan fynden kan också indikera förekomsten av cellulär immunitet. Detta är särskilt fallet när bevis på minnesceller visas genom upptäckt av IL-2 eller en kombinerad upptäckt upptäckt av IL-2 och INF-y Enligt inledande studier förblir SARS-CoV-2-specifika T-cellsvar möjliga att upptäcke i CoV iSpot under lång tid. Relativt kortlivade antikroppssvar, men långvarig T-cellsimmunitet, vilket innebär att SARS-specifika minnes-T-celler fortfarande kan hittas hos SARS-patienter från 2003 år 2020.

Antydan på en möjlig grundläggande immunitet

I CoV-iSpot används även andra humanpatogena coronavirus för att stimulera lymfocyter för att klargöra frågan om grundläggande immunitet genom det cellulära immunsystemet efter tidigare kontakt med coronavirus som är endemiska över hela världen. Om det finns bevis för PAN-koronaspecifika T-cellssvar i CoV iSpot och dessa patienter inte blir sjuka eller endast utvecklar milda symtom efter en SARS-CoV-2-infektion, verkar en cellulär basimmunitet mycket trolig. Observationen att patienter med ett reaktivt PAN corona peptide-svar ofta inte uppvisar SARS-CoV-2-antikroppar talar också för en cellulär basimmunitet. Virusinfekterade celler elimineras av T-effektorceller innan antikroppsbildning sker via stimulering av plasmaceller.

Kommande influensasäsong

Den kommande influensasäsongen kommer sannolikt att öka antalet misstänkta SARS-CoV-2-fall som testas till nya toppnivåer. Med CoV-iSpot har vi en modern cellulär testmetod för att skilja mellan influensa och COVID-19-infektioner. I synnerhet de senaste rönen om potentiell cellulär immunitet mot SARS-CoV-2 och en förmodligen befintlig grundläggande immunitet genom korsreagerande T-celler kan ge ytterligare säkerhet.